中西復方免疫增強劑對雞新-支二聯苗的免疫增強試驗
來源: 發布日期:2011-02-26 發布者:曉天 共閱1517次
雞新城疫(ND)和雞傳染性支氣管炎(IB)是影響養雞業的一種常見傳染病,發病率和死亡率較高,嚴重威脅著養雞業的發展,近年來人們采用免疫增強劑提高新-支二聯苗的免疫效果,收到了較好療效。但是目前一些化學藥物免疫增強劑存在毒副作用和污染殘留較強的弊端,中草藥免疫增強劑又多以粉散劑拌料應用,使用不方便,而中西藥結合的復方免疫增強劑的免疫增強作用尚未見報道,為此筆者將從中草藥中提取出的有效活性成分的多糖,與具有免疫增強作用的化學藥物結合,制備出了緩釋中西復方免疫增強劑,對雞新-支二聯弱毒疫苗的免疫增強效果進行了研究試驗,現介紹如下。
一、材料與方法
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緩釋中西復方免疫增強劑:由黃芪多糖、淫羊藿多糖、左旋咪唑、維生素E、 鈉制成顆粒劑,重約0.25克/粒,本課題組研制。
1%雞紅細胞懸液,雞新城疫(ND)4單位抗原和雞傳染性支氣管炎(IB)4單位抗原:本課題組隨用隨配。
雞新-支二聯弱毒疫苗:批號為獸藥生字(2006)080072038,黑龍江生物制品一廠生產。
另外,還有96孔V型板、微量滴管、稀釋棒等器械。
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將80只30日齡的蛋雞,隨機分成試驗組和對照組,分別皮下注射新-支二聯弱毒疫苗2頭份/只,同時給試驗組雞投服緩釋復方免疫增強劑1粒/只,對照組不投服。在免疫前、免疫后10、20、30和40天,每組隨機采5只雞血樣,分離血清后用HI試驗測定新城疫、傳染性支氣管炎的抗體效價,用E玫瑰花環形成試驗(ERFC)測定T淋巴細胞ERFC形成率。
二、試驗結果
1.可顯著提高新-支二聯弱毒疫苗的抗體效價
試驗前新城疫和傳染性支氣管炎抗體效價均較低,試驗組與對照組差異不顯著(P>0.05),免疫后10和40天,試驗組新城疫抗體效價顯著高于對照組(P<0.05);免疫后20和30天,試驗組新城疫抗體效價高于對照組,差異極顯著(P<0.01)。結果表明,免疫后10、20、30和40天,試驗組傳染性支氣管炎抗體效價均顯著高于對照組(P<0.05)。
表1 抗體效價測定結果(㏒2. X±S)
2.可使新-支二聯弱毒疫苗 T淋巴細胞ERFC形成率顯著升高
試驗前T淋巴細胞ERFC形成率均較低,試驗組與對照組差異不顯著(P>0.05)。免疫后10和20天,兩組T淋巴細胞ERFC形成率均逐漸升高,差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01);免疫后30和40天,兩組T淋巴細胞ERFC形成率均逐漸降低,差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)。
表2 雞T淋巴細胞ERFC形成率測定結果(% .X ±S)
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三、試驗小結
?。ㄒ唬┲?、西藥免疫增強劑可顯著增強機體體液免疫功能
體液免疫是機體抵抗傳染病的主要因素之一,抗體是介導體液免疫的重要分子,抗體效價的高低直接反應機體的體液免疫狀態。免疫增強劑能夠促進抗體的產生,延緩抗體的下降或消失,黃芪多糖(APS)具有促進免疫功能和抗體生成,提高巨噬細胞活性和血清IgG水平,抑制EAS,雙向調節血糖等作用。李宏全等(2001)將黃芪多糖分別與新城疫Ⅰ系苗、Ⅳ系苗、油乳劑苗和傳染性法氏囊凍干苗以肌肉注射、皮下注射、點眼、滴鼻等不同方式配合使用,均可使雞血清中新城疫和傳染性法氏囊病的抗體效價在相同日齡、不同日齡、不同黃芪多糖用量3種情況下顯著高于未使用組,顯示了明顯的免疫增強作用;程志斌等(2002)報道,黃芪多糖能使小鼠脾臟內漿細胞增生,促進抗體生成,增強體液免疫。
淫羊藿是補腎壯陽中藥,主要含淫羊藿甙、黃酮、多糖等多種有效成分,劉家國等(2000)檢測結果顯示,淫-蜂佐劑抗原組兔血清特異性抗體水平顯著高于無佐劑抗原組,抗體高水平維持的時間更長,產生的時間亦更早。
近年來研究發現左旋咪唑( LEV)具有特異性和非特異性抗體增強作用,韓雪清等(1996)試驗表明,左旋咪唑具有增強傳染性法氏囊和新城疫苗聯合免疫的免疫應答,即具有抗傳染性法氏囊對新城疫的干擾作用,雞口服左旋咪唑 7~14天即可表現出免疫增強作用。
同時有關研究還證實硒能提高畜禽的體液免疫和細胞免疫功能,增強機體對傳染病的抵抗力。鄧樺等(2001)在雛雞新城疫疫苗二次免疫前2天起,連續3天以 鈉飲水給予不同劑量硒,結果新城疫HI抗體滴度顯著或極顯著地高于對照組,紅細胞Ⅰ型補體受體(CRⅠ)活性較對照組高。
維生素E可激活B淋巴細胞的抗原增殖,參與從IgM到IgG抗體合成的轉化。姚金水等(1994)試驗表明維生素E-硒注射液,對蛋用雛雞新城疫HI抗體和淋巴細胞ANAE陽性率均比對照組有明顯提高。
本研究試驗將中草藥中的有效活性成分黃芪多糖、淫羊藿多糖與具有免疫增強作用的西藥左旋咪唑、維生素E、 鈉有機結合起來,取長補短,相互協調,發揮各自藥物優勢,以粘合劑為骨架,研制出中西藥相結合的雞用緩釋復方免疫增強劑,配合雞新-支二聯弱毒疫苗免疫蛋雞,顯著或極顯著地提高了新城疫和傳染性支氣管炎的抗體效價,表明雞用緩釋復方免疫增強劑能夠促進抗體產生,增強體液免疫功能。
?。ǘ┲?、西藥免疫增強劑可顯著增強機體細胞免疫功能
細胞免疫反應過程主要包括淋巴細胞的增殖與分化、淋巴因子的分泌,免疫的主要效應細胞是T細胞、自然殺傷細胞和NK細胞。T淋巴細胞ERFC形成試驗能夠檢測外周血液中T淋巴細胞百分數,敏感地反應機體細胞免疫水平和動態變化,有關研究發現免疫增強劑能夠提高T淋巴細胞百分率、E-玫瑰花環形成率、外周血淋巴細胞或脾細胞對植物血凝素、刀豆蛋白A或脂多糖等絲裂原刺激的轉化能力。
唐雪明等(1998)研究表明,黃芪多糖對21、35日齡雛雞T淋巴細胞轉化功能有增強作用;淫羊藿具有增強正常免疫動物T淋巴細胞功能,提高IL-2生產水平等作用。
胡元亮等(2000)對雛雞注射淫羊藿-蜂膠合劑可顯著提高雛雞T淋巴細胞轉化率和NK活力,提高細胞免疫和母雞的體液免疫功能。
喬彥良等(2000)研究表明左旋咪唑可影響正常雞的免疫功能,顯著促進雞外周血T淋巴細胞增殖,但對B淋巴細胞無明顯影響,2.5~10毫克/千克左旋咪唑可使CD+4/CD+8淋巴細胞比值明顯升高。
硒和維生素E具有協同作用,能明顯提高NK細胞活性和T淋巴細胞轉化率,文杰等(1996)在日糧中添加80毫克/千克維生素E,可以提高28日齡肉雞血液淋巴細胞轉化率。
本研究試驗通過緩釋復方免疫增強劑配合雞新-支二聯弱毒疫苗免疫蛋雞,可以顯著或極顯著地提高雞T淋巴細胞ERFC形成率,表明該免疫增強劑能夠增強雞細胞免疫功能。而且雞用緩釋復方免疫增強劑給藥途徑方便,在雞體內釋放緩慢,藥效維持時間較長,對于增強雞的免疫功能,預防雞新城疫和傳染性支氣管炎的發生具有重要作用,值得推廣應用。
作者簡介:作者簡介:劉瑞生(1968-),男,碩士,助理研究員,從事畜禽疾病防治研究工作。
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